Técnicas de Análisis Hematológico

OBJETIVO El objetivo de la práctica es realizar un contaje de hematíes en cámara de neubauer. FUNDAMENTO Los recuentos celulares son procedimientos que se utilizan para determinar el número de los distintos tipos celulares en una unidad de volumen de sangre (generalmente, en 1 mm cúbico). Para lo que usamos reactivos  MATERIALES Y REACTIVOS Microscopios Cámara de neubauer Líquido de Hayen: 2,5g de sulfato sódico, 0,5g de cloruro sódico, 0,25g de cloruro mercúrico, 100ml de agua destilada MUESTRA La sangre total anticoagulada con EDTA. PROCEDIMIENTO La sangre total anticoagulada con EDTA se diluye en una proporción 1/200 con un diluyente isotónico que evite la lisis de los hematíes, el diluyente más utilizado es el líquido de Hayem y es el que vamos a usar nosotros. Una vez cargada la cámara, el recuento se efectúa en el cuadrado primario central, que está dividido en 16 cuadrados secundarios de 0,2 mm de lado, cada uno de los cuales está...

OBJETIVO El objetivo es determinar la resistencia osmótica de los eritrocitos problema. FUNDAMENTO Someter a los hematíes a una serie de soluciones salinas hipotónicas de concentración creciente determinando, a el grado de hemólisis en cada una de ellas. En condiciones normales, y empleando sangre sin incubar, la hemólisis se inicia a la concentración de NaC1 de 55 g/L y es prácficamente total a la de 3 g/L. Esta prueba, aunque muy útil puede verse influida por diversos factores que a veces dificultan su destacando reticulocitosis y la eventual coexistencia de hipocromía. MATERIALES PROCEDIMIENTO Cogemos sangre recién extraída que incubamos durante 24 horas a 37ºC. En una gradilla colocamos 10 tubos de 5 ml (numerados del al 10) y vamos añadiendo agua destilada y solución salina en las siguientes proporciones: A continuación agregamos a cada tubo 0.1 mL de sangre total heparinizada y homogeneizada previamente con varios movimientos suaves. No utilizar nunca como...

OBJETIVO El objetivo de la práctica es determinar la capacidad de fijación de el Hierro. FUNDAMENTO La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe3+ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnésico, determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada (CFTH) y el hierro sérico inicial (Hb) nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual. UTILIDAD CLÍNICA El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. El hierro se controla, normalmente, junto con la capacidad de fijación total del hierro (CFTH), y nos indica la capacidad de unión sérica disponible. Encontramos niveles altos de CFTH en la anemia ferropénica. Niveles bajos en hemocromat...

OBJETIVO El objetivo de esta práctica es determinar el hierro en suero de una forma cuantitativa. FUNDAMENTO El hierro se disocia del complejo sérico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de hierro en la muestra ensayada. UTILIDAD CLÍNICA El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado. El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. Su déficit causa anemia ferropénica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas. El diagnostico clínico debe realizarse ten...

OBJETIVO El objetivo de esta práctica es determinar la hemoglobina retenida por una resina de intercambio iónico. FUNDAMENTO Después de preparar un hemolizado, las hemoglobinas son retenidas por una resina de intercarnbio iónico. La hemoglobina A2 (HbA2) se eluye de forma específica bajo estrictas condiciones de pH y fuerza iónica, cuantificándose por lectura fotométrica a 415 nm. MATERIALES Espectrofotómetro Pipetas graduadas Pipetas pasteur PROCEDIMIENTO Preparación de el hemolizado: Preparar en un tubo de ensayo 50 micro litros de sangre y 200 micro litros de agua destilada. Agitar, este hemolizado se uülizará en los pasos 3 y 7. Separación y lectura de ta HbA2 (Notas 1 y 2) Destapar la parte superior de la Microcolumna, romper a continuación la lengüeta inferior y bajar el disco superior hasta el nivel de la resina, evitando comprimirla, con la ayuda del extremo plano de una pipeta. Dejar gotear hasta que el líquido alcance el nivel del disco...

OBJETIVO El objetivo de la práctica es determinar la velocidad de sedimentación globular de los elementos formes de la sangre. FUNDAMENTO La VSG consiste en medir la velocidad con la que sedimentan los glóbulos rojos provenientes de una muestra sanguínea, que previamente hemos obtenido vía venosa y mezclado con un anticoagulante, en un periodo determinado. Se calcula midiendo la distancia entre la superficie del menisco correspondiente a la columna eritrocitaria y la parte superior de la columna de nuestra muestra de sangre y después dividiendo el resultado por el tiempo. UTILIDAD CLÍNICA Los principales usos de la medición de la VSG son: Para detectar procesos inflamatorios o infecciosos. Como discriminador o reactante de presencia de enfermedad. Como control de la evolución de ciertas enfermedades crónicas ó infecciosas. Para detectar procesos crónicos inflamatorios ocultos o tumores. El valor de la técnica no es muy sensible y además poco específica, por sí s...