Determinación Cuantitativa del Hierro
OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es determinar el hierro en suero de una forma cuantitativa.
FUNDAMENTO
El hierro se disocia del complejo sérico hierro-transferrina en medio
ácido débil. El hierro libre se reduce a ión ferroso mediante el ácido
ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un
complejo coloreado. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de
hierro en la muestra ensayada.
UTILIDAD CLÍNICA
El hierro es el constituyente de un gran número de enzimas. La
mioglobina, proteína muscular, contiene hierro, así como el hígado.
El hierro es necesario para la producción de hemoglobina, molécula
que transporta el oxígeno en el interior de los glóbulos rojos. Su
déficit causa anemia ferropénica. Se encuentran niveles elevados de
hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en
concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es
común en poblaciones sanas.
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datos clínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
MATERIALES
- Espectrofotómetro
- Cubetas de espectrofotometría
- Equipamiento habitual de laboratorio
MUESTRA
- Suero o plasma heparinizado
PROCEDIMIENTO
- Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada, también la temperatura y longitud de onda de 562 nm.
- Pipetear en una cubeta:
- Mezclar e incubar 5 min a 37ºC o 10 min a temperatura ambiente.
- Leer las absorbancias (A) del patrón y la muestra frente al blanco de reactivo.
RESULTADOS
Despejamos la fórmula con los datos obtenidos y el resultado fue de 161.728 µg/dL.
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