Recuento Hematíes

OBJETIVO

El objetivo de la práctica es realizar un contaje de hematíes en cámara de neubauer.

FUNDAMENTO

Los recuentos celulares son procedimientos que se utilizan para determinar el número de los distintos tipos celulares en una unidad de volumen de sangre (generalmente, en 1 mm cúbico). Para lo que usamos reactivos 

MATERIALES Y REACTIVOS

• Microscopios
• Cámara de neubauer
• Líquido de Hayen: 2,5g de sulfato sódico, 0,5g de cloruro sódico, 0,25g de cloruro mercúrico, 100ml de agua destilada
  
  
  
  
  

MUESTRA

La sangre total anticoagulada con EDTA.

PROCEDIMIENTO

1. La sangre total anticoagulada con EDTA se diluye en una proporción 1/200 con un diluyente isotónico que evite la lisis de los hematíes, el diluyente más utilizado es el líquido de Hayem y es el que vamos a usar nosotros.
2. Una vez cargada la cámara, el recuento se efectúa en el cuadrado primario central, que está dividido en 16 cuadrados secundarios de 0,2 mm de lado, cada uno de los cuales está subdividido a su vez en 16 cuadrados terciarios. En concreto, se cuentan cinco cuadrados secundarios: las cuatro esquinas y uno de los centrales.

RESULTADOS

Para realizar los cálculos finales hay que tener en cuenta que cada cuadrado secundario tiene un área de 0,04 mm2 (0,2 mm 0,2 mm) y en él se depositan las células contenidas en 0,004 rnrn3 (0.04 mm3 de área por mm de altura), Como se cuentan cinco cuadrados secundarios, el volumen total contado será de 0,02 mm3.

Teniendo en cuenta estos datos y la dilución utilizada (1/200) el recuento de hematíes se calcula con la siguiente fórmula:

En nuestro caso el contaje fue de 767 hematíes en un cuadro grande (16 cuadritos), se multiplicó por los cinco cuadros y después se despejó la fórmula, obteniendo un resultado de 383.500.000.

OBSERVACIONES

Para poder enfocar y visualizar bien al microscopio la cuadrícula de la cámara y los hematíes, que no están teñidos, hay que aumentar el contraste bajando el condensador del microscopio.